高效液相色谱图固相萃取（高效液相色谱法固相萃取检测饮料中纽甜）
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发布时间：2023-04-06 20:45:25
纽甜也叫尼尔甜，化学名称N-[N-(3，3一二甲基丁基)-L-α-天冬氨酰]-L-苯丙氨酸-1-甲酯，是一种功能性甜味剂，甜度达到我们熟知蔗糖的2000倍，产品的价格相对低廉，质量稳定，目在饮料零食等都有所使用。微源实验室查阅文献资料后，实验了一种适用于检测机构的纽甜检验方法。
精确称取纽甜标准0.1 g，配制成1 mg／mL的纽甜标准储备液，于冰箱保存；取非果肉类沉淀饮料10g左右，先用3mL甲醇，4mL水活化平衡固相萃取柱，将提取液上样，用10mL水和2mL50％的甲醇溶液依次淋洗去除杂质，最后用甲醇：三氟乙酸溶液(100：0.015)洗脱，收集洗脱液2mL，混匀后进样；将标准液用超纯水稀释成浓度分别为5μg／mL，10μg／mL，20μg／mL，标准溶液。
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色谱柱 |
CAPCELLPAKC18(4.6mmX250mm，5μm)； |
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流动相 |
乙腈：0.015％三氟乙酸溶液=30：70(v／v） |
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流速 |
1.0mL／min： |
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柱温 |
30℃ |
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检测波长 |
210nm |
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进样体积 |
20μL |
在上述色谱条件下进行HPLC测定，得到饮品的色谱图。纽甜浓度在0.5μg／mL-50μg／mL范围内作标准曲线图。
平行测定50μg／mL纽甜标准溶液6次，相对标准偏差为1.6％。在流动相为等度的实验条件下，纽甜的保留时间大约在13 min，谱图峰形尖锐选择性好，和其他常用甜味剂和防腐剂实现了较好的分离。线性关系良好，当定容体积为2mL，进样20μL时，方法的检出限为0.05mg／kg。该方法满足实际检测需要，可以满足食品卫生监督检测工作。
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